BETA LACTAMASA (PRUEBA DE PENICILINASA)

Información detallada
Código de Examen 
Recipiente   M35
Sinónimos   Test de Susceptibilidad para Organismos productores de Penicilinasa
Volumen Normal   
Volumen Pediátrico   
Recolección   

Agente bacteriano patógeno aislado de muestras clínicas. Cultivos de Hemophillus influenzae, Moraxella catarrhalis, Neisseria gonorrhoeae, Enterococos, Staphylococcus aureus o bacilos gram negativos anaerobios como el Bacteroides fragilis.
Días de proceso   Lunes a Domingo
Tiempo de Análisis   Diario.
Almacenamiento   

El Cultivo puro puede almacenarse refrigerado a 4oC. hasta por una semana.
Contraindicaciones   Cepa no viable
Utilidad   

Ciertas bacterias producen enzimas que inactivan los antibióticos Beta lactámicos. Algunas enzimas pueden hidrolizar la penicilina (penicilinasas); otras hidrolizan cefalosporinas (cefalosporinasas). En estos caso la detección de la producción de la enzima es esencial en la determinación de la terapia adecuada. Este test sirve para la detección rápida de la producción de beta-lactamasa de colonias aisladas de Haemophillus influenzae, Neisseria gonorrhoeae, Moraxella catarrhalis, S.aureus y Enterococcus sp. Este test puede ser usado para predecir la resistencia a las penicilinas y algunas cefalosporinas. La mayoría de las colonias aisladas de S.aureus produce beta-lactamasa y así, son a menudo tratadas como beta-lactamasa positiva sin pruebas para la producción de la enzima.
Limitaciones   

Especies fastidiosas tales como Haemophilus spp, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae, y S. viridans y Streptococcus ß-hemolítico requieren suplementos o diferentes medios para crecer y ellos deberían ser probados en los medios específicos.
Método   

Los métodos de acidimetría utilizan indicadores de color de pH para detectar aumento en la acidéz que resulta cuando el anillo beta-lactam de la penicilina es dividido para producir ácido peniciniloico. El ácido peniciniloico puede también reducir iodina que puede detectarse como la decoloración de una mezcla de almidón iodado. Este método es referido como método iodométrico. El método más comúnmente utilizado es el de reactivo cromogénico de cefalosporina. La hidrólisis del anillo beta-lactam resulta por un cambio rápido de color. La prueba cromogénica puede detectar a la vez la penicilinasa y la cefalosporinasa.
Rango de referencia   Beta lactamasa Negativa
Información Técnica   

El método de nitrocefina es favorecido por los anaerobios porque éste detecta las cefalosporinasas producidas por el Bacteroides fragilis y el Bacteroides melaninogenicus, como también, la penicilinasa producida por otros anaerobios. Este método también es recomendado para probar los aislamientos de S.aureus y M.catarrhalis.
La producción de beta-lactamasa mediada por plásmidos ocurre de un 5%-15% en los aislamientos clínicos de H.influenzae tipo b. Siembargo, otros mecanismos de resistencia han sido también observados. Las pruebas de rutina de H.influenzae para producción de beta-lactamasa es realizada en la mayoría de los laboratorios.
Preparación   Cultivo puro aislado en el laboratorio
Información adicional   

Las pruebas basadas en nitrocefin son las ideales para probar Haemophilus spp., N. gonorrhoeae, y Moraxella catarrhalis, Staphylococcus spp. y Enterococcus spp. Pruebas iodométricas pueden ser usadas para probar N. gonorrhoeae pero sólo pruebas basadas en Nitrocefin pueden ser usadas para Moraxella catarrhalis. La exacta detección de ß-lactamasa en Staphylococcus spp. puede requerir inducción de la enzima e incubación de la prueba basada en Nitrocefin hasta por una hora. La inducción puede ser fácilmente hecha probando el crecimiento desde la zona margen alrededor del disco de oxacilina. Se debe tener cuidado cuando se realicen estos ensayos para obtener buenos resultados, cepas de control positivas y negativas conocidas deben usarse al mismo tiempo que son examinadas las aisladas en clínica.

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