INDICE DE ANEUPLOIDIA (CITOMETRIA)

Información detallada
Código de Examen 
Recipiente   M01
Sinónimos   Análisis de Tumores por Citometría de Flujo
Volumen Normal   
Volumen Pediátrico   
Recolección   

Porción de tejido fresco fijado con formalina o con parafina, o aspirado con jeringa.
Días de proceso   Lunes a Viernes
Tiempo de Análisis   Al día siguiente
Almacenamiento   Temperatura ambiente
Contraindicaciones   
Utilidad   

Cuantificar el contenido de DNA nuclear y la actividad replicativa de las células del neoplasma. La presencia de picos aneuploides, representando núcleos con cantidades anormales de DNA y/o un aumento en el porcentaje de células activamente sintetizadoras de DNA, puede ser de ayuda pronóstica, independiente del grado o etapa del tumor.
Limitaciones   

Este análisis no es por si solo diagnóstico de malignidad. Los resultados deberán ser interpretados con cuidado y experiencia. Los resultados tienen mayor significado cuando son aplicados al diagnóstico de malignidad establecida por histopatología. Los neoplasmas con líneas de células diploides, aún si la malignidad, puede ser indistinguible por ésta técnica de un tejido benigno o normal. Algunos neoplasmas pueden llevar múltiples lineas tallo, algunos aneuploides, otros no. Algunos neoplasmas tienen diploidia cercana a las lineas tallo el cual dificulta o es imposible para identificar como anormal. Algunos adenomas benignos contienen células aneuploides, y el contenido de DNA de algunos carcinomas del mismo tejido puede ser diploide como por ejemplo adenoma adrenal cortical o adenocarcinomas. El uso de bloques poco fijadores o el inadecuado almacenamiento puede aumentar los artefactos los cuales podrían ser interpretados como picos aneuploides. Evite el uso de bloques con fijadores precipitantes como el B-5 o Zenker, que tienden a producir pobre coeficiente de variabilidad y la posibilidad de una proteína nuclear total no interpretable y datos de luz desviados. Si es posible, un bloque separador de tumor debe fijarse con una formalina sin buffer. La citometría de flujo fijado con formalina, tejido con parafina no siempre detectan poplaciones de células aneuploides, cuando son comparados con análisis de tejido fresco. El análisis de DNA por citometría de flujo, comparado con el análisis de imágen, demostró gran concordancia.

Método   

Citometría de flujo de una suspensión de células teñidas las cuales se unen cuantitativamente al DNA, generalmente con bromuro de ethidio o yoduro de propidio. El núcleo fluoresce cuando es exitado por el rayo láser del citómetro, y emite una luz, directamente proporcional a la cantidad de DNA nuclear, detectado y cuantificado por los tubos fotomultiplicadores del equipo. Cuando los núcleos han sido lo suficientemente analizados (generalmente de 5000-10000), es generado un histograma reportando el número de núcleos con una cantidad de DNA determinada. Mucha de esa información puede ser desarrollada sobre un sistema de análisis de imágen cuantitativa ( microscopia fluorescente o de luz con morfometría cuantitativa y reducción de datos computarizados). El sistema de análisis de imágen reúne información sobre cientos de células.
Rango de referencia   
Información Técnica   

Muchos cáncer tienen cantidades anormales de DNA nuclear y no es sorprendente para alguien que ha observado tejidos malignos al microscopio. Desde luego esto probablemente es la base para el significado pronóstico del sistema histológico, en el cual los tumores vistos aún por el peor de los observadores, no implica un peor pronóstico de las muestras que vienen de los pacientes. Si la citometría de flujo no ofrece más que una confirmación cuantitativa de este fenómeno, este resultará unicamente costoso. La citometría es utilizada para dividir tumores tipo euploides (diploides) o aneuploides. Un tumor es clasificado como diploide si la distribución del DNA tiene una mayor proliferación del nódulo que el valor del DNA diploide normal. Dicho valor es tipicamente derivado de un cultivo de células de la línea fibroblástica o de células normales procesadas en el mismo bloque como el tumor. La medición del DNA es relativamente insensible y puede haber ganancia o pérdida de varios cromosomas o ser eliminados y no ser detectados.
Preparación   
Información adicional   

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