V.I.H1/V.I.H 2 ANTICUERPOS

Información detallada
Código de Examen 
Recipiente   M04
Sinónimos   Serología para Sindrome de Inmunodeficiencia Adquirida; Anticuerpos para HIV
Volumen Normal   1 ml de suero
Volumen Pediátrico   0.5 ml de suero
Recolección   Plasma con Heparina de Litio
Días de proceso   Lunes a Domingo
Tiempo de Análisis   Al día siguiente
Almacenamiento   Estable 7 días a temperatura ambiente, 7 día refrigerado y congelado por tiempo indefinido.
Contraindicaciones   
Utilidad   

Documentar exposición a HIV-1 y HIV-2; prueba de tamizaje en sangre y devidados sanguíneos para transfusiones; prueba de tamizaje para donantes de órganos para transplante.
Limitaciones   

Existen de 2-12 semanas de intervalo después de la infección antes de que los anticuerpos empiecen a ser detectables. Una prueba de tamizaje positiva debe ser confirmada después por técnicas más específicas, generalemente western blot. Si el Western blot para HIV es negativo o indeterminado con una serología para HIV-1/HIV-2 positiva, es necesario una realizar una prueba para HIV-2. Esta puede incluir EIA para HIV-2 y Western blot para HIV-2. Los anticuerpos no protegen contra la enfermedad. Hay algunos test que dan reacciones cruzadas debido a antígenos de histocompatibilidad desiguales (en particular anticuerpos HLA-DR4). Las reacciones cruzadas han sido observadas también con otros antígenos virales. Una vacuna reciente contra el virus de la influenza puede resultar reactivo para antígeno p24 y dar un falso-positivo por ELISA. Debido a que los test de tamizaje no son 100% específicos, solos o en combinación, un resultado positivo debe ser interpretado cautelosamente, considerando la prevalencia de SIDA en la población que está siendo analizada. Como la comparación en la prevalencia disminuye en los grupos de alto riesgo, el número de falsos-positivos aumenta, y el valor predictivo de un resultado positivo disminuye.
Método   Ensayo Inmuno Enzimático por micropartículas (MEIA).
Rango de referencia   Negativo
Información Técnica   

El virus de la Inmunodeficiencia Adquirida (HIV-1, forma HTLV-III), un lentivirus, es el agente etiológico del SIDA. La diseminación de la infección aguda por la sangre o por contacto sexual, generalmente se presenta como una gripa o puede ser asíntomática. Durante este tiempo, el antígeno de HIV, usualmente la proteína central P24, puede detectarse en suero. Este comienza a ser negativo de 2 semanas a 1 mes. Sigue luego un período de semanas a meses (hasta 35 meses) durante el cual un individuo es infectado con HIV, el cual puede o no replicarse a baja velocidad, pero las pruebas de tamizaje para HIV son negativas. El HIV preferencialmente se une e infecta los linfocitos CD4 (T4 ayudadores) debido a la envoltura viral que es una glicoproteína con 120 gp unida específicamente a la membrana proteica del CD4, una herramienta determinante de ayuda para la diferenciación. El HIV también se une a los monocitos y los macrófagos, y los macrófagos en la infección bronquial pueden explicar la frecuencia de infección por Pneumocystis en pacientes con SIDA. El HIV probablemente entra en el SNC por medio de monocitos infectados que atraviesan la barrera hematoencefálica. El genoma RNA del HIV incluye los cuadros de lectura abierta, el gen transactivador, una terminal larga repetida, incial y terminal, y genes para el antígeno específico del grupo viral, la envoltura viral, y la transcriptasa reversa. Las proteínas y la glicoproteínas más importantes en los test serológicos producidas por dichos genes son el antígeno p24, la proteína central 24KD; gp41, una glicoproteína de envoltura 41kD; y gp160 y gp120, glicoproteínas de envoltura 160 kD y 120 kD. La gp160 es probablemente la proteína precursora del gp120 y el gp41, y no es expresada en el virus intacto. Una prueba subordinada para SIDA incluye la cuantificación de linfocitos CD4 (ayudadores) y CD8 (supresores). En el SIDA (pero no es diagnóstico para este), las células T4 son severamente reducidas y la relación CD4:CD8 es menor de 1. Un conteo absoluto de CD4 < de 300/mm está indicado para la terapia con AZT. Los test de tamizaje para anticuerpos HIV son técnicas de ELISA las cuales usan productos de antígenos recombinantes. Diferentes anticuerpos son detectados. Tanto la sensibilidad como la especificidad de estas pruebas son extremadamente altas, pero cualquier resultado positivo, deberá ser repetido; si es positivo por segunda vez, deberá ser confirmado por la técnica de Western blot. Debido a las graves implicaciones de un resultado positivo, se recomienda el análisis de una segunda muestra para eliminar los falsos-positivos debido al posible intercambio de muestras o muestras contaminadas. Algunos individuos pueden presentar pruebas de tamizaje reactivas, y ser completamente negativos por Western blot. Esto puede ser debido a antígenos de histocompatibilidad que reaccionan con las proteínas de la superficie celular incorporadas en el kit de la prueba, a reacción cruzada de anticuerpos contra otros antígenos virales, o autoanticuerpos que reaccionan con los componentes de los substratos de las células humanas lisadas. Han sido reportados positivos-falsos en individuos que han recibido gama-globulina intravenosa. Aunque esos positivos-falsos son debidos a anticuerpos de la transfusión de la gama-globulina, el análisis se deberá repetir en 3 meses ( la vida media de la Ig.G es alrededor de los 3 semanas), podría mostrar un resultado negativo o muy débil. En el procedimiento de Western BLot, se separan electroforéticamente las proteínas y glicoproteínas contenidas en el suero. Los anticuerpos presentes se unen al apropiado antígeno, el cual es separado de los demás componentes virales por su peso molecular. La unión del anticuerpo es luego visualizada por una reacción de un anticuerpo marcado con una enzima o radioisótopo tipo inmunoglobulina humana o proteína A ( la cual une la porción Fc del anticuerpo). Aunque, se usan muchos patrones para la interpretación de los resultados positivos , desde 1988, dos patrones principales son utilizados. El Consorcio para la Estandarización de la Serología del Retrovirus recomienda que un blot positivo presente las siguientes bandas: p24 o p31 plus gp41 o gp 160/120. La Asociación de Estandarización de los laboratorios de Salud Pública del estado y de todos los territorios fué adoptado por el Centro para Control de Enfermedades en 1989 y ahora es la definición de Western blot positivo más ampliamente aceptada. Este criterio requiere que el Western blot tenga al menos de las siguientes 3 bandas: p24, gp 41, y gp 160/120. La presencia de otros patrones de bandas es llamado indeterminado y deberá ser estudiado por test subsecuentes. El Western blot es un proceso complejo, que requiere una gran experiencia técnica para su interpretación. El porcentaje de falsos-positivos puede estar en un rango de 1% a 2%. El rango de falsos-negativos aún no ha sido bien establecido. Las pruebas inmunoenzimáticas más recientes permiten la detección de ambos anticuerpos HIV-1/HIV-2. Además los antígenos recombinantes de HIV-1: p24, p 17 y endonucleasa p 31 han sido combinados con dos péptidos sintéticos del gen de envoltura de HIV-1 y el gen de envoltura HIV-2 para proveer un ensayo confirmatorio basado en una tirilla similar a la del Western blot. El RIBA es una técnica de antígeno recombinante similar al inmunoblot que ha sido propuesta como método alternativo para la confirmación de HIV-1 y que emplea HIV-1p24, p31, p41 y gp 120. Respuesta Serológica Usual: Dentro de los 7-10 días de infección, el antígeno circulante de HIV puede ser demostrado. Este tiene una vida corta y desaparece a las 2 semanas. Entre los 10 días y 2 semanas de la infección, aparecen anticuerpos tipo Ig.M contra HIV; este último dura varias semanas. Entre las 6-16 semanas de infección, los anticuerpos tipo Ig.G comienzan a ser detectables. Estos patrones son generalizados y deben ser mejor interpretados a la luz de la siguiente información: persistencia o reaparición del antígeno de HIV puede ser una señal de progreso de la enfermedad; el primer anticuerpo en aparecer es el anti-p24, pero no se detecta en más del 40% de los pacientes seropositivos; el anticuerpo más comunmente detectado es el anti-gp41; el anti-p24 sin el anti-gp120 o anti-gp160 son ocasionalemente observados como resultados positivos-falsos. La Latencia Prolongada de HIV ha sido sugerida en varios estudios.Los anticuerpos y antígenos virales pueden ser demostrados por PCR (reacción en cadena polimerasa) hasta más de 35 meses antes de que el individuo seroconvierta por la técnica de ELISA. Dichos individuos pueden tener un número normal de linfocitos CD4. El tamizaje para la infección de SIDA en las poblaciones de bajo riesgo puede verse impedido por resultados falsos positivos. Aunque la combinación de los test de Western blot y ELISA en cuanto a la velocidad secuencial de los falsos-positivos puede ser muy baja (estimada en el 0.005%) el análisis de un número grande de individuos de una población con muy baja prevalencia de la enfermedad podría generar un número inmanejable de resultados falsos-positivos. El valor predictivo de un test positivo podría ser bajo, y muchos individuos podrían ser alarmados innecesariamente. Para pacientes que reciben transfusiones de derivados sanguíneos: entre 1978 y 1985, las técnicas de ELISA disponibles eran satisfactorias como un procedimiento inicial de exclusión para infección accidental por transfusión. Aquellos pacientes que reciben solamente globulina inmune Rh u otros productos de gama-globulinas, no necesitan ser analizados a menos que pertenezcan a algún otro grupo de riesgo. Los test retrospectivos del análisis de los recipientes de sangre y de la evaluación en el riesgo de transfusión asociada a SIDA, han sido emprendidos. Ahora cada donante de sangre es analizado para anticuerpos anti-HIV-1 (y HTLV-I) para proporcionar una sangre aceptablemente segura; el riesgo por unidad es bajo aproximadamente del 0.003%. En 1992 se comenzó a estandarizar el análisis de las muestras para HIV-1/HIV-2. En los grupos de pacientes de alto riesgo (hombres homosexuales o bisexuales, drogadictos, hombres y mujeres prostitutas, hemofílicos) deberán ser analizados para diagnóstico. Esto incluye un test de ELISA inicial y test de antígeno HIV. Repetir el test cuando sea necesario. No hay patrones de respuesta serológica para HIV aún conocidos que indiquen resolución de la enfermedad o pérdida de infectividad (diferente en el virus de la Hepatitis B). Un grupo de pacientes de riesgo con anticuerpos y antígenos demostrables presumiblemente está infectado. El otro virus causante de SIDA es el HIV-2, que fué descubierto en 1986. El HIV-2 está muy estrechamente correlacionado con el HIV-1 con un 40% de homología en los ácidos nucleicos. El HIV-2 es endémico en el oeste de Africa, sinembargo, este se diseminó por otros países. En 1991, 31 casos fueron confirmados en los Estados Unidos. Este produce clinicamente la misma enfermedad que el HIV-1, aunque el período de incubación antes del desarrollo de la clínica del SIDA en el HIV-2 es mayor que en el HIV-1. Aunque el compromiso del sistema nervioso central es extremadamente común en el SID, el análisis del antígeno para HIV o de anticuerpos en LCR carece de sensibilidad y especificidad. Estas pruebas no ayudan a la diferenciación de los síntomas neurológicos entre la infección secundaria por HIV de aquella debida a neoplasmas del SNC o a infecciones oportunistas.
Preparación   

En algunos casos la prueba no debe ser realizada o los resultados informados sin previa autorización del paciente.
Información adicional   

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